Berk2006-Sequences
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<body lang=EN-US link=blue vlink=purple style='tab-interval:.5in'>
To Do<o:p></o:p>
Ogel MC600u x M1/P1 (2 clones), pBACr-90* x MG984, pMF19, MG1655 x MC600u/P1 (2 clones plus dust?)<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Comp MGu x UG874<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
sub pSB3C6-Bca1020 (for r0040)<o:p></o:p>
Sub pMP908<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Sub new locks<o:p></o:p>
Sub new promoter J23119<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Grow to assay J23066, x locks (<st1:time Minute="30" Hour="17">5:30</st1:time>)<o:p></o:p>
Stock, seq 62, M1, UG874<o:p></o:p>
Outgrow UG874 x MC600u<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Riboregulators<o:p></o:p>
To do: keys that anneal further upstream, repairing the rbs in lock, cytometry on the above.<o:p></o:p>
Make pSB3C6-I13521<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Conjugation<o:p></o:p>
Screen the trbC mutants by PCR/phenotype, clear pKD46<o:p></o:p>
oriTf mutant x 1064, test phenotype<o:p></o:p>
Rlam traG mutant, screen colonies<o:p></o:p>
trbC/traG complementation plasmids (Pcon-rbs is good, maybe need to reprep)<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
<o:p> </o:p>
<o:p> </o:p>
<o:p> </o:p>
<o:p> </o:p>
LB + 5 mM CaCl2 and 0.2% glucose<o:p></o:p>
LB + 100 mM MgSO4 + 5 mM CaCl2<o:p></o:p>
200 µL 1 M Na-Citrate (pH 5.5)<o:p></o:p>
chloroform<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Berk prop/email adam<o:p></o:p>
Meet w/ Wendell,Shaffer,other bioE<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Solid phase on plate<o:p></o:p>
Sequence pCP20, clone it into new pMP plasmid<o:p></o:p>
UCSF Safety<o:p></o:p>
K99<o:p></o:p>
Mouse serum/Balb/c<o:p></o:p>
Venter<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
########### ##########c###############<o:p></o:p>
########### #########################<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
<o:p> </o:p>
Inject BO828/pBACr-CyoWbb / pAC-TetInv / pBR-GFP into tumors, tetR library, fdhF-tetR inverter<o:p></o:p>
<o:p> </o:p>
Email Jamie for protocols<o:p></o:p>
Email Jack about tailvein injections<o:p></o:p>
</body>
</html>