Biomod/2012/TeamJapan/Sendai/Results/Electrophoresis: Difference between revisions
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| M13(84nM) | | M13(84nM) 4.8μL | ||
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| 10×TAE Mg<sup>2+</sup> | | 10×TAE Mg<sup>2+</sup> 10μL | ||
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| ステイプル(field)① 10μL | | ステイプル(field)① 10μL | ||
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|計 250μL | |||
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ステイプル(field)②を95°C~25°Cまで１°C2分の条件でサーマルサイクラーにかけ、アニーリングを行う。 | |||
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|計 | | 三角柱ステイプル33本 各1μL | ||
|計 | | M13(84nM) 10μL | ||
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| mQ 92μL | |||
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| ステイプル(三角柱)① 10μL | |||
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|計 125μL | |||
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フィールドステイプルと同様、95°C~25°Cまで１°C2分の条件でサーマルサイクラーにかけ、アニーリングを行う。 | |||
これらを高速AFMにより観察した結果が以下である。 | |||
②DNAオリガミの精製を行う。（PEG沈、エタ沈） | ②DNAオリガミの精製を行う。（PEG沈、エタ沈） | ||
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④加える脂質のパラメータを決める。用いるDNAに対しての濃度の決定。 | ④加える脂質のパラメータを決める。用いるDNAに対しての濃度の決定。 | ||
⑤脂質を加えて引っ付くかどうかを確認する。 | ⑤脂質を加えて引っ付くかどうかを確認する。 | ||
Revision as of 20:19, 9 August 2012
＜実験＞
STAGE１目的：脂質でDNAオリガミが引っ付くかの確認
①BIOMOD2011のフィールドおよび三角柱を製作する。
昨年BIOMODで用いたDNAorigamiのレースフィールドおよびロボット本体であった三角柱を作成する。
参考[1]
実験条件
| ステイプル(field)① | ステイプル(field)② |
|---|---|
| フィールドステイプル222本 各1μL | M13(84nM) 4.8μL |
| mQ 33μL | 10×TAE Mg2+ 10μL |
| ステイプル(field)① 10μL | |
| mQ 75.2μL | |
| 計 250μL | 計 100μL |
ステイプル(field)②を95°C~25°Cまで１°C2分の条件でサーマルサイクラーにかけ、アニーリングを行う。
| ステイプル(三角柱)① | ステイプル(三角柱)② |
|---|---|
| 三角柱ステイプル33本 各1μL | M13(84nM) 10μL |
| mQ 92μL | 5×TAE Mg2+ 20μL |
| ステイプル(三角柱)① 10μL | |
| mQ 60μL | |
| 計 125μL | 計 100μL |
フィールドステイプルと同様、95°C~25°Cまで１°C2分の条件でサーマルサイクラーにかけ、アニーリングを行う。
これらを高速AFMにより観察した結果が以下である。
②DNAオリガミの精製を行う。（PEG沈、エタ沈） ③引っ付けるためにどのような脂質を用いるか決める。 ④加える脂質のパラメータを決める。用いるDNAに対しての濃度の決定。 ⑤脂質を加えて引っ付くかどうかを確認する。
