Etchevers:Notebook/Genomics of hNCC/2008/09/10
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Passages againPassées: hNCC céphaliques et hNCC troncales en conditions Panexin 5% (P) et milieu Riche (R). Une boite 35 mm en P et deux boites en R. 90% confluents ou plus par endroit. Rincer PBS, 0.5 mL trypsine-EDTA 3 minutes 37ºC puis reprise dans 1 ml PBS sans Ca++/Mg++ et transfert au 7 ml de F12/ 15% sérum. Tourner 333g (1200 rpm) pour 5 minutes. Les cellules en P se collent encore beaucoup entre elles mais se détachent de la boite. Comptages :
Ajout: 5x trop gros. Voir ici. Heather 06:27, 15 September 2008 (EDT)
Cela se traduit ainsi :
Ce n’est pas bien – elles ne prolifèrent pas, si on peut se fier aux comptages (absence de gros agglomérats) et pour le milieu+Panexin, ou les cellules céphaliques (R), elles périclitent carrément. Pourtant, les céphaliques qui avaient une tête différente en milieux S ou 401 avant-hier ne sont pas très malheureuses aujourd’hui dans ces boîtes 10 cm. Les S sont un peu comme des chapeaux tricornes ou à 4 pointes, les 401 plus polyédrales. Mais bien disséminées et peu de mortes. Les cellules qui flottaient dans la boite avec le milieu C6000 ont été reprises et centrifugées. J’ai resuspendu dans du bleu trypan et regardé : elles sont majoritairement vivantes (excluant le bleu) pourtant avec des blebs et vésicules, non lisses et rondes, et il y a aussi beaucoup de fantômes et de débris. A voir plus tard si tu n’essaies pas de les ressemer dans une boite 35mm avec un milieu qui favorise l’adhesion style 401, Stempan ou Panexin. Pour l’instant il y a :
Stéphane changera le milieu vendredi. Les Panexin 5% (P) ont 8 ml au lieu de 10 dans les autres boîtes 10 cm.
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