IGEM:Peking/2007/Switch: DNA ligation

连接

1．普通连接的体系为10uL，其中片断+载体5uL，Ligation Kit 5uL。

2．Ligation Kit需在冰盒中溶化。分装至1.5mL离心管中使用。

3．先加片断，后加载体。

4．管口用Parafilm封好。

5．16℃反应1hr以上。

注意：连接酶25℃达到最大活性，3min失活。4℃活性较低，但可以保持过夜。16℃的性质在二者之间。4℃连接过夜的效果最好。根据片断与载体连接的难易程度选择连接的温度与时间。