Nuclear Gene HS Takara PCR Optimization
Test amount of Instagene DNA template
HS Takara RXN Mixture 3.0ul Instagene
|
conc
|
1X
|
5.5
|
'
|
Milli Q water |
|
3.1 |
17.05 |
|
Takara HS Buffer |
10X |
2 |
11 |
|
dNTP |
2.5uM |
0.8 |
4.4 |
|
Primer Mix |
20uM |
4 |
|
|
HS Taq |
5U |
0.1 |
0.55 |
|
Template |
Instagene |
3 |
16.5 |
|
|
|
|
49.5 |
9.0ul / RXN
|
|
|
|
|
add 1.0ul Primer
|
HS Takara RXN Mixture 4.0ul Instagene |
conc |
1X |
5.5 |
|
Milli Q water |
|
3.1 |
17.05 |
|
Takara HS Buffer |
10X |
2 |
11 |
|
dNTP |
2.5uM |
0.8 |
4.4 |
|
Primer Mix |
20uM |
4 |
|
|
HS Taq |
5U |
0.1 |
0.55 |
|
Template |
Instagene |
4 |
22 |
|
|
|
|
55 |
9.0ul / RXN
|
|
|
|
|
add 1.0ul Primer
|
A PCR cycle |
|
|
|
|
95C |
3 min |
|
|
|
95C |
5 sec |
|
|
|
60C |
1 min |
|
|
|
x35 |
|
|
|
|
AMP Lane
|
Template
|
Primer
|
Amt of Template
|
1 |
1 Instagene |
A2 |
3
|
2 |
1 Instagene |
A3 |
3
|
3 |
1 Instagene |
A4 |
3
|
4 |
1 Instagene |
A5 |
3
|
5 |
1 Instagene |
A6 |
3
|
6 |
2 Instagene |
A2 |
3
|
7 |
2 Instagene |
A3 |
3
|
8 |
2 Instagene |
A4 |
3
|
9 |
2 Instagene |
A5 |
3
|
10 |
2 Instagene |
A6 |
3
|
11 |
AV Instagene |
A2 |
3
|
12 |
AV Instagene |
A3 |
3
|
13 |
AV Instagene |
A4 |
3
|
14 |
AV Instagene |
A5 |
3
|
15 |
AV Instagene |
A6 |
3
|
16 |
1 Instagene |
A2 |
4
|
17 |
1 Instagene |
A3 |
4
|
18 |
1 Instagene |
A4 |
4
|
19 |
1 Instagene |
A5 |
4
|
20 |
1 Instagene |
A6 |
4
|
21 |
2 Instagene |
A2 |
4
|
22 |
2 Instagene |
A3 |
4
|
23 |
2 Instagene |
A4 |
4
|
24 |
2 Instagene |
A5 |
4
|
25 |
2 Instagene |
A6 |
4
|
26 |
AV Instagene |
A2 |
4
|
27 |
AV Instagene |
A3 |
4
|
28 |
AV Instagene |
A4 |
4
|
29 |
AV Instagene |
A5 |
4
|
30 |
AV Instagene |
A6 |
4
|
31 |
AV 1ng |
A2 |
1
|
32 |
AV 1ng |
A3 |
1
|
33 |
AV 1ng |
A4 |
1
|
34 |
AV 1ng |
A5 |
1
|
35 |
AV 1ng |
A6 |
1
|
Load 2.0ul Sample
|