User:Etchevers/Notebook/Conference notes/2009/09/29

Conference and seminar notes

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Réunion de groupe Lyonnet/Vekemans 29-9-09 Claude viendra réunion prochaine. Chris voir diapos vendredi, lundi – présentation réunion mardi. 46, XX pseudo-hermaphroditisme masculin (nouvelle classification ?) – différenciation garçon – verge en hypospadias, mais bourses normales. Duplication en amont de SOX9 (600kb). Pas de SRY – vérification par PCR. PIS goat http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18769074 – FOXL2 also has pseudo-hermaphroditisme masculin – régule SOX9, 46, XX ont réversion sexuelle. Régulation trop précoce de Sox9 qui impacte sur la synthèse des oestrogenes. Dans les campomelias- reversion sexuelle va dans l’autre sens 46, XY mais phenotype Trop d’expression de SOX9 masculinise ; SRY régule SOX9 normalement mais il n’est plus nécessaire si SOX9 est allumé. Voir l’abstract de Chris Ottolenghi sur dosage de FoxL2 vs Wnt4 chez la souris : http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19538736 Isabelle Janouiex ira aux Assises pour présenter NB. Alexis répétition : A bit too quick at beginning for embryological explanations, long on surgery – but perhaps ok for audience. Tissus différents dans le teratome. Add labels directly on slide and animate? Définir “trois feuillets embryonnaires”. Définir cellule souche, ajouter mots au schéma – qu’est-ce qui définit une SC? Pourquoi a mis cellules “souches” entre guillemets? Projet de recherche – trop de texte. Méthodes : IHC : TSC, embryons, fœtus ; culture cellulaire. A ajouter : RT-PCR sur les cultures. Xenogreffes. Objectif – à développer. Orientation des coupes d’embryon, définir les stades par age. Sortir juste ce qu’on veut montrer, pas toute la figure. Same for older foetuses. Esp last line, make them much bigger. Epithelium co-exprimant SOX2 NANOG OCT4 aussi exprimant SOX9 dans teratome. Cela ne veut-il pas juste dire que ce n’est pas un vrai choix de marqueurs de “pluripotence”? – necessaire, mais non suffisant ? Ne les appelle pas « corps embryoide ». Boule de cellules. C’est tout ce qu’on peut dire. « Il faudrait d’autres experiences » - pas ideal dans une presentation. Sur RT, doit encadrer les bandes qu’on veut voir. Marquage C-M1/M3 par immuno mais rien sur RT. Injection des souris – à mettre, que veut-il montrer ? Conclusions – pondère trop. Qu’a-t-il vraiment fait ? -- Critiques – expliquer les techniques a chaque fois qu’on introduit un résultat. Ce qu’on fait mais pas comment. TSC avant embryons. Enlever SOX9 sur cette diapo, Jeanne suggère – prélèvement du tissu frais – décrire la technique de mise en culture. Rectangles sur RT avec animations. Ajouter b-actin. Message – perte de cellules les plus indifferenciees dans les teratomes tardifs. Immunocyto fait plus precocement. J’obtient ce qui ressemble a des corps embryonnaires que dans les précoces, puis d’ailleurs par RT, je confirme cette différence au niveau moléculaire… Phenotype +RT sur même dia – Pourquoi injection sur les souris – sinon mettre en perspectives toujours. Culture – precoce/tardifs. RTs – montrer. Conclusions – J’ai montre ceci et cela et ça va a l’appui de mon hypothèse. (Qu’est-ce qui en reste ?) Perspectives : Compte tenu de cela, comment cela modifie les approches chirurgicales ? Enlever le coccyx – pas d’explication embryonnaire… ? Utilisation de SOX9 pour le coccyx. Est-ce qu’il y a de l’expression de alpha-FP dans les embryons/fœtus normaux ? Pourquoi pas + de récidives ? Encapsulement.